On the Holy Ghost
De Spiritu Sancto.
Tieto tri knihy o Duchu Svätom možno považovať za pokračovanie traktátu De Fide a boli tiež adresované Gratianovi na základe jeho žiadosti v roku 381 po Kr. V tomto traktáte svätý Ambróz ukazuje, že Duch Svätý je Boh a má jednu prirodzenosť a podstatu s Otcom a Synom.
Využíva pritom gréckych spisovateľov, SS. Didima, Bazila Veľkého a Atanáza a na tomto základe ho napadol svätý Hieronym.